Ключевые слова: моксидектин, празиквантел, щенки, котята, переносимость
Реферат
Изучена переносимость комбинации моксидектина и празиквантела в препарате Гельмимакс на щенках и котятах в условиях ветеринарных учреждений, питомника и вивария в г. Москве и Московской области в 2016 – 2017 году. Переносимость изучалась на 2-месячных беспородных щенках, спонтанно инвазированных токсокарами, в режиме 3-кратных терапевтических доз: 0,75 мг/кг моксидектина и 15 мг/кг празиквантела перорально ежедневно в течение 10 дней и на 2-месячных клинически здоровых котятах при ежедневном пероральном введении терапевтической дозы: 0,25 мг/кг моксидектина и 5 мг/кг празиквантела в течение 5 суток. Для изучения переносимости щенки были разделены на 2 группы: опытная (n=5) и контрольная (n=3). Контрольная группа вместо лечения получала питьевую воду. В ходе исследований животных ежедневно осматривали, для оценки переносимости проводили гематологические исследования до и после введения препарата. При изучении переносимости на щенках и котятах было установлено отсутствие статистически достоверных фатов негативного влияния антигельминтика на весовые показатели животных опытных и контрольной групп. Согласно данным клинического осмотра показатели жизнедеятельности при введении высоких доз препарата не были нарушены, неврологический статус животных соответствовал показателям нормы. Препарат не оказывал негативного влияния на морфологические и биохимические параметры крови щенков и котят.
Введение
Моксидектин по своей химической структуре представляет собой макроциклический лактон класса мильбемицинов и обладает широким спектром нематодоцидного действия. Механизм действия моксидектина, как и у других макроциклических лактонов, – связывание с ГАМК-рецепторами паразитов и увеличение проницаемости мембран для ионов хлора, что подавляет электрическую активность мембран нервных клеток у нематод [1]. При изучении общетоксических свойств моксидектина на собаках, имеющих дефект гена MDR-1 и без него разовая пероральная доза составляла 1120 мкг/кг и не вызывала у животных нежелательных побочных реакций, при этом собаки с дефектным геном лучше переносили моксидектин, чем ивермектин. При изучении пероральной токсичности моксидектина на собаках наблюдали дозозависимое угнетение при испытании его в дозах от 0,87 мг на кг веса животного в сутки [11,13,14]. В другом исследовании введение моксидектина в дозах 30, 60 и 90 мкг/кг подкожно взрослым собакам (10- 20- и 30-кратная терапевтическая доза) не вызывало каких-либо нейротоксических эффектов [13].
Празиквантел относится к классу изоквинолиновых соединений и в терапевтических дозах вызывает повышение мышечной активности, сменяющееся сокращением мускулатуры и спастическим параличом, в более высоких дозах - вызывает повреждение тегумента паразита. Активность празиквантела обусловлена его способностью повышать проницаемость мембран для ионов кальция и некоторых других одно- и двухвалентных катионов [1,7]. Празиквантел обладает низкой острой пероральной и парентеральной токсичностью, не обладает эмбриотропными и мутагенными свойствами [4]. Даже при введении 5-кратных терапевтических доз празиквантела собакам и овцам в течение 5 дней не наблюдалось значимых изменений при проведении сравнительных клинических, гематологических, клинико-химических и постмортальных исследований [12].
Полученные данные свидетельствуют о высокой переносимости празиквантела и моксидектина в экспериментальных условиях.
В связи с этим целями наших исследований было изучение общетоксического действия комбинации двух паразитоцидов - моксидектина и празиквантела на примере препарата Гельмимакс в модификациях: Гельмимакс-4 для котят и Гельмимакс-10 для щенков средних пород в условиях многократного повышения терапевтической дозы.
Материалы и методы
Изучение переносимости комбинации моксидектина и празиквантела проводили в 2016 - 2017 году на 8 спонтанно инвазированных Тохосаrа canis беспородных щенках в возрасте 2 месяцев на базе стационарного отделения ветеринарной клиники «Leben» (г. Москва), весом 2,96±0,27 кг и на 5 беспородных здоровых котятах в возрасте 2 месяцев в условиях вивария ФГБНУ ВНИИВСГЭ (ф-л п. Новый Милет, Московская обл.), весом 0,70±0,06 кг. В качестве препарата был использован Гельмимакс-10 для щенков средних пород и Гельмимакс-4 для котят (ООО НПО «Апи-Сан», РФ). Условия кормления и содержание опытных животных было организовано по единым требованиям в соответствии с [5,6,10]. При изучении переносимости перед началом исследования животных подвергли карантину. Щенки были разделены на группы по принципу аналогов. Опытной группе щенков препарат вводили перорально в трехкратной терапевтической дозе - 0,75 мг/кг моксидектина и 15 мг/кг празиквантела ежедневно в течение 10 дней. Контрольная группа щенков вместо препарата получала питьевую воду (n=3).
Всем котятам вводили перорально препарат Гельмимакс-4 при пересчете по массе тела 0,25 мг/кг моксидектина и 5 мг/кг празиквантела в течение 5 дней. Оценку клинического статуса подопытных животных производили согласно [2,3,9]. Оценку полученных результатов гематологических исследований проводили по [8]. Гематологические исследования проводили 3-кратно при изучении переносимости на щенках: 0, 6, 12 день и 3-кратно при изучении переносимости на котятах: 0, 7 день и выборочный биохимический контроль уровня трансаминаз на 14 день наблюдения.
Результаты подвергли статистическом анализу, используя методы вариационной статистики с t-критерием Стъюдента. Различия определяли при 0,05 уровне значимости. Статистический анализ выполняли с помощью программы «Student-200».
Результаты исследований
В ходе исследования при определении весовых показателей статистически достоверных изменений массы тела щенков и котят опытных и контрольной групп не установлено. Все опытные животные хорошо набирали вес. Показатели температуры тела щенков контрольной и опытной групп, а также котят до и после введения препарата соответствовала показателю нормы для данного вида и возраста животного. Согласно данным клинического осмотра животных показатели жизнедеятельности при введении препарата не были нарушены, неврологический статус животных соответствовал показателям нормы. Показатели ЧСС, СНК, а также результаты термометрии подопытных животных статистически не отличались от показателей физиологической нормы для данного вида и возраста животных. Результаты гематологических исследований на щенках также не выявили различий в группах (Таблица 1).
Таблица 1. Морфологические и биохимические показатели крови щенков до и после введения препарата (M±m)
| Показатели | Группы животных | |||
| Опытная группа (0 день) | Контрольная группа (0 день) | Опытная группа (12 день) | Контрольная группа (12 день) | |
| Содержание гемоглобина, г/л | 87±2,8 | 88±3 | 99±7 | 103±6 |
| Содержание эритроцитов*1012/л | 3,9±0,2 | 3,8±0,1 | 5,4±0,8 | 4,9±0,1 |
| Содержание лейкоцитов*109/л | 17±1 | 15,3±1 | 15±0,6 | 16,2±1,5 |
| Содержание тромбоцитов, г/л | 415±59 | 455±64 | 500±84 | 415±29 |
| Палочкоядерные, % | 3,2±1,7 | 3,7±2,8 | 0 | 0,3±0,7 |
| Сегментоядерные, % | 55±12 | 63±9 | 71±3 | 68±12 |
| Эозинофилы, % | 2±1 | 2,3±1,7 | 1,8±1 | 2,3±0,7 |
| Моноциты, % | 18±11 | 8,7±3,5 | 4,2±1,8 | 6,7±1,7 |
| Лимфоциты, % | 22±8 | 23±8 | 23±2 | 23±12 |
| Билирубин общий, мкмоль/л | 2,8±0,5 | 2,4±0,6 | 5,3±1,4 | 5,1±1,1 |
| Аспартатаминотранфераза, ед./л | 20±3 | 22±4 | 34±4 | 35±3,5 |
| Аланиламинтрансфераза, ед./л | 21±8 | 17±6 | 19±3 | 23±3,5 |
| Мочевина, ммоль/л | 5±0,9 | 4,4±0,8 | 6±1 | 5,4±1,2 |
| Креатинин, мкмоль/л | 45±6 | 46±5 | 43±4 | 48±2 |
| Общий белок, г/л | 55±12 | 63±9 | 71±3 | 68±12 |
*Примечание: данные по 6 дню исследования не отражены в таблице так как не имеют статистически значимых отличий от показателей в 12 день.
Таблица 2. Морфологические и биохимические показатели крови котят до и после введения препарата (M±m)
| Наименование показателя | 0 день | 7 день | 14 день | Референтные значения |
| Содержание гемоглобина, г/л | 102±7,3 | 99±8,6 | - | 80-150 |
| Содержание эритроцитов*1012/л | 7,3±0,6 | 6,8±0,5 | - | 5,3-10 |
| Содержание лейкоцитов*109/л | 20,8±4,8 | 16±3,9 | - | 5,5-18,5 |
| Содержание тромбоцитов, г/л | 299±112 | 413±81 | - | 160-630 |
| Палочкоядерные, % | 0,8±0,7 | 0 | - | 0-3 |
| Сегментоядерные, % | 63±8,3 | 53±7,2 | - | 35-75 |
| Эозинофилы, % | 6,2±3,4 | 8,4±2,6 | - | 0-4 |
| Моноциты, % | 1,2±0,4 | 1,2±0,4 | - | 1-4 |
| Лимфоциты, % | 28±7,1 | 37,2±7 | - | 20-55 |
| Билирубин общий, мкмоль/л | 6,2±0,9 | 8,9±0,8 | - | 2-12 |
| Аспартатаминотранфераза, ед./л | 29±4,4 | 72±32 | 31±2,6 | 8-42 |
| Аланиламинтрансфераза, ед./л | 52±13 | 114±37 | 48±3,4 | 5-58 |
| Мочевина, ммоль/л | 11,4±0,6 | 9±0,8 | - | 5,4-12,1 |
| Креатинин, мкмоль/л | 77±15 | 85±7 | - | 70-165 |
В ходе исследования по изучению переносимости у щенков, инвазированных Toxocara canis, отмечались анемичность видимых слизистых оболочек, низкая активность, увеличение подчелюстных лимфоузлов, болезненность брюшной стенки при пальпации и ее выпячивание, зловонные фекалии. На вторые сутки после применения препарата у всех щенков опытной группы отмечали разжижжение фекальных масс. На третьи сутки применения препарата клиническое состояние щенков улучшилось: увеличилась активность, появился аппетит, цвет видимых слизистых оболочек стал бледно-розовым.
У котят комбинация моксидектина и празиквантела не оказывала отрицательного влияния на кроветворение. Умеренная эозинофилия у животных определялась как до, так и после введения препарата. Значение эозинофилов к концу опыта было на 4,4 единицы (или на 110%) выше референтного значения. Для сравнения перед исследованием этот же показатель был выше у котят лишь на 2,2 единицы (55%). Таким образом, к концу опыта относительное содержание эозинофилов было выше на 2,2 единицы или на 35,5% по сравнению с данными 0 дня. Применение антигельминтика не оказывало негативного влияния на мочевыводящую систему котят, повышение активности ферментов АСТ и АЛТ в 1,5 – 2 раза на 7 день может свидетельствует о негативном влиянии на печень, однако при повторном через 7 дней исследовании содержание в крови трансаминаз соответствовало показателям физиологической нормы (Таблица 2). У инвазированных Toxocara canis щенков перед введением препарата отмечались анемичность видимых слизистых оболочек, низкая активность, увеличение подчелюстных лимфоузлов, болезненность брюшной стенки при пальпации и ее выпячивание, зловонные фекалии. И уже на третьи сутки применения препарата отмечали улучшение клинического состояния животных в опыте: увеличилась активность, появился аппетит, цвет видимых слизистых оболочек стал бледно-розовым.
TOLERABILITY OF MOXIDECTIN AND PRAZIQUANTEL COMBINATION ON KITTENS AND PUPPIES
Key words: moxidectin, praziquantel, puppies, kittens, tolerability
ABSTRACT
The tolerability efficiency of a combination of moxidectin and praziquantel (Helmimax) was studied on puppies and kittens of veterinary institutions, nursery and vivarium in Moscow and the Moscow Region in 2016 - 2017. Tolerability was studied on 2-month-old puppies invaded by Toxocara of 3-therapeutic doses: 0.75 mg / kg of moxidectin and 15 mg / kg of praziquantel PO administration for 10 days and 2-month-old healthy kittens PO administration in therapeutic dose: 0.25 mg / kg moxidectin and 5 mg / kg praziquantel for 5 days. Therapeutic efficacy was studied in 27 puppies of service-breeds and 25 kittens according to the instructions for use. The puppies was divided into 2 groups: experimental (n = 5) and control (n = 3) in study of tolerability. The control group received drinking water instead of treatment. In the course of the studies, the animals were examined daily, hematologic examinations were carried out before and after administration of the drug to assess the tolerability. The study of tolerability in the experimental and control groups does not detect of statistically significant facets of the negative effect on the weights of animals. The vital signs were not violated after drug administration, the neurological status corresponded to the norm of everyone, according to the data of the clinical examination. The drug did not adversely affect the morphological and biochemical parameters of puppies and kittens blood.
Статья опубликована: Журнал «Вопросы нормативно-правового регулирования в ветеринарии» №2-2017
Вывод
- Архипов, И.А. Антигельминтики: фармакология и применение / И.А. Архипов. – М.: Россельхозакадемия, 2009. - 406 с.
- Беляков, И. М., Дугин, Г. Л., Кондратьев, В. С. [и др.]. Практикум по клинической диагностике с рентгенологией / И. М. Беляков [и др.]. – М.: КолосС, 1992. – 289 с.
- Вилер, С., Томас, В. Неврология мелких домашних животных. Цветной атлас в вопросах и ответах: пер. с англ. / С. Вилер, В. Томас; под ред. О. А. Корнеевой. – М-Аквариум-2011-152 с.
- Дорошина, М.В. // Бюлл. Всес. ин-та гельминтол. - 1982.–Вып. 32. – С. 24-28.
- ГОСТ 33217-2014. Правила содержания и ухода за лабораторными хищными млекопитающими. - Введен впервые; введ. 01.07.2016. - М.: Стандартинформ, 2016. – 12с.
- Руководство по лабораторным животным и альтернативным моделям в биомедицинских исследованиях / под ред. Н.Н. Каркищенко, С.В. Грачева. – М.: Профиль-2С, 2010. – 358с.
- Пламб Дональд К. Фармакологические препараты в ветеринарной медицине: пер. с англ. / Д. К. Пламб; под ред. Е.И. Осипова.- М.- Аквариум, 2002. – 856 с.
- Уиллард Э., Тведтен Г., Торнвальд Г., Уиллард М. Лабораторная диагностика в клинике мелких домашних животных: пер. с англ. / Э. Уиллард [и др.]; под ред. В.В. Макарова. - изд. 3-е. - М-Аквариум-2004-432 с.
- Уша, Б. В., Беляков, И. М., Пушкарев, Р. П. Клиническая диагностика внутренних незаразных болезней животных / Б. В. Уша [и др.].- М – КолосС – 2004 - 487 с.
- Хабриев, Р.У. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ / Под общей редакцией члена-корреспондента РАМН, профессора Р.У. Хабриева. – 2-изд., перераб. и доп. – М.: Медицина, 2005. – 832 с.: ил.
- European Medicines Agency [Электронный ресурс]/ Scientific discussion– CVMP/0297/03 – EMEA, 2009- p. 61.
- Frohberg H. Results of toxicological studies on praziquantel -Arzneimittelforschung. 1984;34(9B):1137-44.
- Mehlhern H. Encyclopedia of Parasitology. Third edition. Springer-verlang, 2008, p. 1571.
- Snowden, N.J, Helyar C.V, Platt S.R., Penderis J. Clinical presentation and management of moxidectin toxicity in two dogs J Small Anim Pract. 2006 Oct;47(10):620-4.
